Comparación de métodos de extracción de ADN de sangre para detectar ADN fúngico por PCR / Comparison of different methods of DNA extraction from blood to detect fungal DNA by PCR

La infección fúngica invasora (IFI) está asociada a un alto índice de mortalidad, que alcanza el 50% debido a la frecuente falla en el tratamiento antifúngico. Existen dificultades para realizar un diagnóstico micológico rápido y certero dada la baja sensibilidad de los métodos convencionales, especialmente en pacientes neutropénicos y con SIDA. Numerosos métodos para diagnosticar infecciones micóticas basados en el estudio del ADN fúngico están actualmente en desarrollo. Nosotros evaluamos la utilidad de dos procedimientos de extracción y purificación del ADN fúngico presente en sangre para su posterior detección por PCR. Ambos métodos resultaron igualmente eficientes para obtener ADNs de óptima calidad y para realizar la técnica de PCR con los iniciadores universales para hongos ITS 1 e ITS 4.

Invasive fungal infections (IFI) are associated with high mortality by reaching levels of 50%, and also with a significant failure in antifungical treatments. This fact mostly obeys to difficulties in obtaining a fast and accurate mycologic diagnosis due to the low sensitivity of conventional methods, mainly in neutropenic and AIDS patients. Various methods based on fungal DNA study are currently being used for the diagnosis of mycotic infections. We herein evaluated two procedures of extraction and purification of fungal DNA in blood for their use in PCR detection. Both of them showed equal efficiency in obtaining high performance DNA with universal primers ITS 1and ITS 4 as target.

Prevalencia de Candida albicans y Candida no albicans en diferentes muestras clínicas: Período 1999-2001 / Prevalence of Candida albicansand Candida no albicans inclinical samples during 1999-2001

Las levaduras implicadas en procesos patológicos son de indiscutible importancia debido al incremento experimentado por estas infecciones en las últimas décadas, a los cambios observados en las especies causales y al uso empírico de antifúngicos. En el Centro de Micología se estudiaron 1006 aislamientos provenientes de una amplia gama de muestras clínicas durante el periodo 1999-2001. Candida albicans con 40,3% resultó la especie de mayor frecuencia de aislamiento, pero las especies de Candida no albicans con 54,9% resultaron de mayor prevalencia y el 4,8% fueron otras levaduras. En los hemocultivos Candida parapsilosis con 34,9%, C. albicans con 30,2% y C. tropicalis con 25,6% resultaron las más recuperadas, mientras que C. glabrata se presentó con un 2,3%. En las secreciones mucosas C.albicans con 60%-80% fue la especie preponderante. Hemos detectado especies de Candida causantes de mediastinitis, lo que nos alerta sobre su importancia en estos procesos. Las infecciones del tracto urinario por levaduras se detectaron en mayor frecuencia en individuos hospitalizados, resultando C. albicans con 47,7% la especie más aislada, y dentro de Candida no albicans, C. glabrata con 24,8% y C. tropicalis con 20,0%. En las onixis candidiásicas C. parapsilosis con 37,7% desplazó a C.albicans con 22,0% de este lugar anatómico. Los estudios de sensiblidad al fluconazol de las especies de Candida nos permiten concluir que C.albicans es una especie sensible y que los mayores porcentajes de resistencia se observaron en C. glabrata (21,41%) y and C. krusei (69,23%).

The importance of epidemiological monitoring of yeasts involved in pathologic processes is unquestionable due to the increase of these infections over the last decade, the changes observed in species causing candidiasis, and empirical antifungal treatment. At the Mycology Center, 1006 isolates from a wide range of clinical samples were studied during 1999-2001. Candida albicans (40.3%) was the most isolated species, although, the Candida no albicans species with 54.9% showed the major prevalence. In blood cultures Candida parapsilosis (34.9%), C. albicans (30.2%) and C. tropicalis (25.6%) were recovered most frequently while C. glabrata represented only 2.3%. C. albicans with 60%-80% was the predominant specie in mucosal surface. We also detected Candida mediastinistis, which alert us over the importance at this location. Urinary tract infections caused by yeasts were more frequent in hospitalized patients, being C. albicans (47.7%), the most commonly isolated, followed by C. glabrata (24.8%) and C. tropicalis (20.0%). In the candidal onychomycoses, C. parapsilosis (37.7%) outplaced C. albicans (22.0%). Fluconazole susceptibility studies of Candida species allowed us to conclude that the majority of C. albicans islolates are susceptible, and that the highest resistance averages were observed in C. glabrata (21.41%) and C. krusei (69.23%).

Susceptibility of Candida species to fluconazole assayed by a disk diffusion method with automated reading versus a microdilution method

In vitro susceptibilities of 290 isolates of Candida spp to fluconazole were evaluated by a new NCCLS M44-P agar disk diffusion method that was read and interpreted automatically by the BIOMIC image-analysis plate reader system. Disk test results were compared to results obtained by a modified NCCLS M27-A broth microdilution method using RPMI-1640 supplemented with 2

. Category agreement between the broth and disk test results for susceptible, susceptible dose-dependent and resistant disk results were 99.6

major discrepancies, and 8.97

minor discrepancies were observed between results of the two test methods. This analysis suggests that results from both methods correlate highly for Candida strains susceptible to fluconazole. The lower agreement between the two methods for resistant and susceptible dose-dependent isolates was due to strains near or on that breakpoint, different media (Mueller-Hinton vs RPMI), agar vs broth, 80

endpoints, and trailing growth near the endpoints.

Ultrastructural changes in Spirodela intermedia in response to osmotically-induced water shortage

The ultrastructural changes produced in the upper mesophyl cells of Spirodela intermedia W. Koch, by the inclusion of polyethylene glycol (PEG) in the nutrient solution, are related to the degree of the osmotically-induced water shortage. The ultrastructural characteristics of the -0.08 MPa treated fronds differed from the untreated ones in the form of the chloroplasts. PEG up to -0.20 MPa induced considerable cell structural disorganization as the swelling, breaking and disappearance of the outer membrane of the chloroplasts and the breakdown of the tonoplast into small vesicles.

Exposición mercurial y estado de salud del personal que labora en el Servicio de Odontología del IPASME Barquisimeto / Mercury exposure and health status of the personnel working at the Dental Service of the IPASME Barquisimeto

Con el objeto de investigar la exposición mercurial y estado de salud del personal que labora en el Servicio de Odontología de la Unidad de IPAS-ME Barquisimeto, se realizó un estudio de corte transversal, utilizándose una muestra de cuarenta y siete trabajadores del Servicio de Odontología, lo cual representa un 92 por ciento del total de la población. Para investigar la exposición del metal mercurio en la orina recolectada en 24 horas, se realizaron análisis de laboratorio, además de exámenes complementarios: Hematología completa, Glicemia y pruebas renales y examen físico. Entre los resultados más relevantes se encontró que la población estudiada presentó niveles aceptables de Hg en orina, un 62 por ciento el nivel básico (0,6 mcg/lts), un 17 por ciento cifras entre 07-14 mcgs/lts, un 19 por ciento cifras entre 15.29mcgs/lts, un 2 por ciento en el nivel de intoxicación preclínica no encontrándose valores iguales o mayor a 50 mcgs/lts, el cual se considera como el índice de contaminación mercurial. Cabe destacar que los resultados de valores mercuriales en los ambientes del Servicio de Odontología se ubicaron por debajo de 0,05 mg/m3 de aire, concentración máxima permitida en ambiente de trabajo en Venezuela, por lo tanto se concluye que no existe exposición a la contaminación mercurial en el personal que labora en el Servicio de Odontología de la Unidad IPAS-ME Barquisimeto. Se espera que con los resultados obtenidos se elaboren y apliquien programas preventivos sobre la contaminación mercurial, con la finalidad de evitar el inicio del proceso de enfermedad debido a la falta de información sobre las normas de higiene mercurial

Nocardiosis cerebral debida a nocardia asteroides / Nocardiosis cerebral on occount of nocardia asteroid

Presentamos el caso de una neocardiosis cerebral en un paciente de 63 años con antecedentes de lesión supurada en el tercio del muslo derecho.Del material de los abscesos cerebrales se aisló N.asteroides y se lo trató con antibióticos: cotrimoxazol y ceftriaxona. Se instiló amikacina en el lecho quirúrgico y además en los pequeños abscesos no resecados. A los seis meses se realizó un control tomográfico y se observó la resolución de las lesiones. Los controles posteriores comprobaron la curación clínica

Esporotricosis experimental en ratas / Sporotrichosis experimental on rats

Ratas endocriadas se infectaron por vía intraperitoneal y en la cola con una suspensión de conidios de Sporothrix schenckii. Los frotis coloreados con May Grunwald-Giemsa y Gram Nicolle, así como los cultivos de macerados de los órganos que se biopsiaron: hígado, bazo, pulmón y glándula suprarrenal y de la cola manifestaron a los l5 días de inoculación una diseminación del hongo; no así a los 30 días de infección, excepto el material correspondiente a la cola que presentó en ese tiempo elementos de S.schenckii. Los estudios inmunológicos realizados permitieron la estandarización del exoantígeno preparado, se detectaron anticuerpos en los sueros de las ratas a los 15 y 30 días posteriores a la inoculación. Las intradermorreacciones realizadas en los animales provocaron una buena respuesta frente al exoantígeno preparado. De esta forma, se comprueba que la rata es un animal adecuado para la infección experimental y la estandarización de antígenos de S.schenckii

Diagnóstico de 2 casos de mucormicosis rino-facio-cerebral en pacientes diabeticos / Diagnosis two cases de rhino-facio-cerebral mucomycosis in diabetic patients

Se presentan dos casos de mucormicosis rino-facio-cerebral de evolución lenta, en pacientes diabéticos. El diagnóstico se realizó por el hallazgo del hongo en el exámen histopatológico y exámenes microcópicos de los materiales drenados de los senos maxilares, que mostraron hifas no septadas y abundantes. En ninguno de los casos se pudo recuperar el agente etiológico por cultivo, debido a la labilidad de los mucorales y por la presencia de un material necrótico de fácil contaminación microbiana

Pubertad precoz secundaria a lesiones intracraneanas / Secondary precocious puberty to intracraneal lesions

Se presentan 5 casos de pubertad precoz estudiados en el Servicio de Neurocirugía del Hospital de Niños "J.M. de los Ríos" de Caracas, todos los sexos masculinos, entre 4 y 7 años de edad, con macrogenitosomía precoz, cambio de voz, cefálea, mareos y trastornos psiquiátricos en 2 de ellos. Todos secundarios a lesiones intracraneanas. La T.A.C. mostró lesión de ocupación de espacio suprasellar en 3, hidrocefalia congénita en 1 por T.A.C. y en otro por ventriculografía. Las dosificaciones hormonales demostraron elevación de las hormonas luteinizante, gonadotrofina cariónica, tetosterona, folículo estimulante, androsterona, dihidroepiandrosterona en 4 de los casos. Tres casos recibieron radio y quimioterapia, con detención de la pubertad precoz en 2 casos, y en 1 caso se realizó orquiectomía bilateral

Nueva técnica para el cierre quirúrgico del miolomeningocele / New technique by surgical skin repair of myelomeningocele

Se describe la utilización por primera vez en Venezuela, de una nueva técnica para la restauración o cobertura de piel, en casos de Mielomeningocele, clasificados de tamaño mediano, menores de 8 centímetros de diámetro. Esta técnica fue desarrollada por Macias y Col; y ha sido utilizada para cubrir defectos de piel de otras zonas del organismo. Consiste en el desplazamiento hacia la línea media, de dos colgajos cutáneos triangulares, localizados a cada lado del Mielomeningocele